蓝白菌斑的原理是什么？
蓝白斑筛选的原理 分类: 生物科学蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法：是根据载体的遗传特征筛选重组子，如 α - 互补、抗生素基因等。
现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的 DNA 的短区段，其中有 β - 半乳糖苷酶基因（lacZ）的调控序列和前 146 个氨基酸的编码信息。
在这个编码区中插入了一个多克隆位点（MCS），它并不破坏读框，但可使少数几个氨基酸插入到 β - 半乳糖苷酶的氨基端而不影响功能，这种载体适用于可编码 β - 半乳糖苷酶 C 端部分序列的宿主细胞。
因此，宿主和质粒编码的片段虽都没有酶活性，但它们同时存在时，可形成具有酶学活性的蛋白质。
这样，lacZ 基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补，称为 α - 互补。
由 α - 互补而产生的 LacZ+ 细菌在诱导剂 IPTG 的作用下，在生色底物 X -Gal 存在时产生蓝色菌落，因而易于识别。
然而，当外源 DNA 插入到质粒的多克隆位点后，几乎不可避免地导致无 α - 互补能力的氨基端片段，使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。
这种重组子的筛选，又称为蓝白斑筛选。
如用蓝白斑筛选则经连接产物转化的钙化菌平板 37℃温箱倒置培养 12-16hr 后，有重组质粒的细菌形成白色菌落。
正文完